星点设计效应面法优化异长春花碱脂质体的处方

目的:制备异长春花碱(vinorelbinevrb)脂质体,并对其安全性进行初步评价。方法:采用薄膜分散法制备vrb脂质体,对vrb脂质体的急性毒性、血管刺激性及溶血性等安全因素进行考察,并以vrb注射液为对照,比较2种制剂的半数致死量(ld50)、溶血性及血管刺激性等指标。结果:所制备的vrb脂质体平均粒径158.3nm,包封率为85.3%;vrb脂质体及注射液的ld50分别为16.02,4.16mg.kg-1;与注射液比vrb脂质体不引起家兔溶血和红细胞聚集反应,静脉注射对家兔血管刺激性较vrb注射液减轻。结论:所制备的vrb脂质体粒径均匀,形态圆整,包封率符合《中国药典》要求,并且和注射液比具有较高的安全性。

目的探讨预防异长春花碱引起静脉炎的护理方法。方法对我科自2006年11月～2007年10月采用深静脉picc置管应用异长春花碱的34例患者护理方法进行分析。结果2例发生轻度静脉炎,无渗漏发生。结论地塞米松及一些必要的护理方法对预防异长春花碱引起的静脉炎的发生有良好的效果,值得临床推广。

目的:对国内外长春花主栽品种的长春质碱含量和农艺性状进行了分析。方法:记录长春花盛花期的农艺性状,反相高效认相色谱仪测定长春质碱含量。结果:发现不同品种的长春质碱含量和农艺性状均存在很大差异,太平洋系列(pacifica)品种polkadot(ppd)中长春质碱质量分数最高,达到叶片干重的3.79mg·g~(-1);清凉系列(cooler)品种pink(cp)中长春质碱质量分数最低,仅为叶片干重的0.9mg·g~(-1)。长春花中长春质碱含量与农艺性状之间存在一定程度的相关性。通径分析表明,长春花主要农艺性状中,节间距对长春质碱含量的正影响达到了显著水平(p<0.05),通径系数为1.473。结论:本研究对高含量长春质碱长春花引种和育种具有参考价值。

硝态氮缓解长春花幼苗海水胁迫效应的研究

为了研究长春花碱对鼠单卵裂球染色体标本制备的影响。以长春花碱为纺锤体中期阻断剂,以czb为基础培养液,研究不同的阻断培养浓度和时间对小鼠4、8-细胞期胚胎单卵裂球中期分裂相数的影响。0.5μg/ml浓度、阻断培养10h组的4-细胞卵裂球中期分裂相检出率最高,而只有0.5μg/ml浓度6、h组,0.1μg/ml浓度8、h组,0.3μg/ml浓度、8h组,0.7μg/ml浓度、8h组,0.1μg/ml浓度、10h组和0.3μg/ml浓度1、0h组与最高值组差异不显著;0.5μg/ml浓度、阻断培养10h组的8-细胞卵裂球中期分裂相检出率最高,而只有0.1μg/ml浓度1、0h组和0.7μg/ml浓度1、0h组与最高值组差异不显著;0.1μg/ml浓度8、h阻断培养的4-细胞单卵裂球的中期分裂相的检出率与0.1μg/ml浓度1、0h阻断培养的8-细胞单卵裂球的差异不显著,其染色体标本的制备质量评分分别为2.7和1.90为确定适宜小鼠早期胚胎单卵裂球的长春花碱处理浓度和阻断培养时间提供了科学依据。

目的:获得胆木茎木、皮及叶中有效成分异长春花苷内酰胺含量高低的研究结果,为挖掘胆木新的药用部位奠定科学基础。方法:采用薄层色谱法,对胆木的茎木、皮、叶中异长春花苷内酰胺化学成分进行定性鉴别;同时采用高效液相色谱技术对该3个部位中异长春花苷内酰胺含量高低进行检测。结果:胆木茎木、皮及叶的薄层色谱图中均出现异长春花苷内酰胺蓝色荧光斑点;且茎木、皮、叶中异长春花苷内酰胺含量值分别为1.22%,1.08%,1.54%。结论:定性鉴别和含量测定的实验结果均表明:胆木茎木、皮、叶中均含有效成分异长春花苷内酰胺,且叶中含量相对较高、皮中含量相对较低。

研究了细胞质膜钙通道阻断剂氯化镧(lacl3)、胞内ip3通道阻断剂肝素(heparin)、胞内cam活性抑制剂三氟啦嗪(tfp)对长春花光合作用的影响,结果发现:ca2+通道阻断剂处理后长春花叶片净光合速率(pn)、psii最大量子产量(fv/fm)、psⅱ实际量子产量(yield)、电子传递速率(etr)、光化学淬灭系数(qp)均下降,非光化学淬灭系数(qn)及chla、chlb、chla+chlb含量上升,表明ca2+通道阻断剂对长春花的光合作用有较大影响,且不是通过加速叶片光合色素降解或抑制其合成来实现抑制叶片的光合能力;其中heparin处理的长春花叶片相关参数变化幅度最大,表明胞内钙库通过ip3通道释放的ca2+在长春花叶片光合作用过程中发挥了更积极的作用.

目的:通过愈伤组织的诱导、增殖与培养条件的优化建立长春花愈伤组织培养体系。方法:以长春花的幼嫩叶片为外植体,在不同激素组合的脱分化、分化培养基上培养。考察抗氧化剂vc对愈伤组织褐化的影响。结果:最佳诱导培养基为ms+1.0mg/l6-ba+0.5mg/l2,4-d;最佳继代培养基为ms+2.0mg/l6-ba+0.5mg/lnaa+0.5mg/l2,4-d,并在该条件下进一步悬浮继代培养。10mg/lvc可有效抑制长春花愈伤组织的褐化。结论:激素kt对该愈伤组织的诱导效应不明显,naa、2,4-d和6-ba均有一定的诱导效应;vc具有抑制长春花愈伤组织褐化的作用。

本文以长春花无菌苗的芽为外植体进行组织培养。适合芽诱导和增殖的培养基为ms+0.50mg/l6-ba+0.06mg/liba+30g/l蔗糖+7g/l琼脂;适合生根的培养基为1/2ms+0.10mg/liba+0.20mg/lnaa+30g/l蔗糖+7g/l琼脂。经生根壮苗培养和炼苗25d后,移栽成活率高达92%。

目的研究盐胁迫对长春花愈伤组织生长及阿玛碱积累的影响。方法用浓度为0、50、100、150mmol/l的nacl处理长春花愈伤组织,测定其鲜质量、干质量、丙二醛(mda)量、光合速率、呼吸速率等生理指标和阿玛碱的量。结果盐胁迫显著地降低了长春花愈伤组织的鲜质量和干质量,提高了mda量、光合速率和呼吸速率;在含有不同浓度nacl的培养基上生长30d后,愈伤组织的阿玛碱量随nacl浓度的增加而逐渐降低;用不同浓度的nacl溶液喷洒生长27d的愈伤组织,发现3d后50mmol/l处理的愈伤组织中阿玛碱量比对照高出近1倍。结论长期盐胁迫能够抑制长春花愈伤组织的生长,同时引起阿玛碱积累的减少;低浓度nacl喷洒处理则对长春花细胞中阿玛碱的积累有较大的促进作用。

目的测定不同产地小蔓长春花中生物碱长春胺的含量。方法采用岛津cs-930双波长薄层扫描仪,单波长线形扫描,以长春胺为标准品,平行测定不同产地种植的小蔓长春花中(主要是叶子)长春胺的含量。结果各样品中长春胺的含量随其生长环境及生长季节而不同。结论本法简便可靠,可作为小蔓长春花种植及资源合理利用的检测手段。

对感染黄化病的海南长春花植株,应用dapi荧光显微技术对其嫩茎和叶柄进行了切片染色观察,结果表明:在感病植株的韧皮部筛管分子中存在大量特异性的植原体dna荧光光点,而在健康植株的筛管分子则未发现有特异性的植原体荧光。另对其茎和叶柄中的植原体含量进行比较,结果显示茎中的含量要比叶柄中稍高。

研究表明芸苔素内酯(br)对蔓长春花试管苗生根有促进作用。br使生根高峰提前、单株有效根数增多、生根率提高,iba对br有增效作用。

目的：鉴定异长春花苷内酰胺酸催化产物的结构，并探讨其反应机理。方法：用hplc监控异长春花苷内酰胺酸催化反应过程，采用大孔吸附树脂纯化反应产物，以ms、nmr和roesy分析确定产物结构。结果：异长春花苷内酰胺在酸催化条件下转化生成喜果苷，其转化率为52％。结论：异长春花苷内酰胺经酸催化可转化为喜果苷，其反应机理可能与化合物立体构型的稳定性有关，该发现提供了制备喜果苷的新方法。

采用不同比例的甲醇-1%二乙胺(ph7.5)、甲醇-1%碳酸铵、乙腈-1%二乙胺(ph7.5)、乙腈-1%碳酸铵为流动相,在比对保留时间的基础上加以光谱确认,并对小蔓长春花提取液中长春胺保留时间及其分离情况进行研究,以选择测定长春胺的最佳流动相体系。结果显示:在甲醇-碳酸铵、乙腈-碳酸铵、乙腈-二乙胺体系中,长春胺峰很难完全分离,其光谱扫描结果与标准品不一致;而在甲醇-二乙胺体积比为65∶35时,长春胺峰可实现基线分离,其光谱扫描结果与标准品一致,且长春胺在0.05~0.5g/l范围内与峰面积线性关系良好(r2=0.997),平均加样回收率为100.71%(n=5),rsd=2.23%。研究表明,甲醇-1%二乙胺(体积比为65∶35,ph7.5)为测定小蔓长春花中长春胺含量的最佳流动相体系,可用于小蔓长春花药材的质量监控。

本文就长春花体内生物碱生物合成途径中受转录因子调控、外界因素对其诱导和调控以及作用机制的研究进展作介绍。

利用issr分子标记技术对广东地区栽培的25个长春花品种进行遗传多样性分析。结果表明,供试的15条引物共扩增出110条清晰的条带,平均每条引物扩增出7.33条;多态性条带为69条,多态性比率(ppb)为62.7%,说明25个长春花品种间存在较丰富的遗传变异,issr标记可用于长春花的遗传多样性分析。品种间的遗传相似系数介于0.69~0.94之间。upgma聚类分析将25个长春花品种分成2组,该聚类结果表明同一系列不同颜色的品种具有较高的遗传相似性,各个商业品系的品种间存在广泛的杂交或具有相同的原始育种材料;花色遗传在分类学上的地位比花眼花色遗传重要;偏蓝色系、白色系均与其他色系相比遗传距离较远。

目的:为提高长春花中有效成分生物碱的含量,利用秋水仙素诱导出长春花同源四倍体,为获得优质长春花四倍体株系打下基础。方法:以秋水仙素为诱导剂,对实生苗顶芽进行处理,考察不同浓度和不同的处理时间对诱导率的影响。对获得的变异株通过形态、染色体计数、流式细胞术等方法进行鉴定,筛选出同源四倍体。结果:毛细管法诱导实体幼苗的顶芽效果较好,0.1%秋水仙素处理72h和0.2%处理48h,四倍体的诱导率分别达到46%和58%。各处理组共获得四倍体38株,四倍体的性状发生了明显变化,茎、叶、花、果变大,四倍体单株干重也高于二倍体。

文多灵(vindoline)具有重要的药用价值。本文利用反相高效液相色谱法检测了23种国内外长春花主栽品种的文多灵含量,对文多灵含量与品种的12个主要农艺性状(包括株高、节间距、茎直径、一级侧枝数、叶片长、叶片宽、叶片长宽比、百片叶重、全株叶片重、花瓣直径、种荚长度和种子数/荚)的相关性和通径进行了分析。相关性分析表明,文多灵含量与一级侧枝数、茎直径、节间距、叶片宽、株高、全株叶片重、百片叶重、花瓣直径和叶片长呈正相关,其中与一级侧枝数和茎直径的相关性达到显著水平(p<0.05),与节间距的相关性接近显著水平;与叶片长宽比、种荚长度和种子数/荚呈负相关。通径分析结果表明,长春花的主要农艺性状中,节间距、一级侧枝数和全株叶片重对文多灵含量的正影响达到了显著水平(p<0.05),通径系数分别为0.959、0.716和0.431,说明节间距、一级侧枝数和全株叶片重可以作为高含量文多灵长春花品种选育的重要参考指标。

目的建立长春花总黄酮的含量测定方法,探讨不同产地长春花中黄酮的含量水平。方法长春花药材以石油醚除去叶绿素等色素后,以甲醇热回流提取总黄酮,经分光光度法测定总黄酮的含量。结果该方法的的线性范围为:8.192~40.96μg@ml-1,回收率为99.0%,适宜于长春花中总黄酮的含量测定;所测定的不同产地长春花中总黄酮的含量在0.64~2.25mg·g-1之间。结论不同产地的长春花中总黄酮的含量水平差异非常显著。

应用正交试验对长春花盆栽生产基质进行了研究。结果表明:泥碳∶珍珠岩∶锯木屑∶菇渣为3∶1∶2∶1(体积比)为最佳组合。