筛选获得草珊瑚与金粟兰鉴别的特异位点并建立双位点特异性PCR方法,用于鉴别草珊瑚与金粟兰叶片以及两者的混杂品。采集不同产地的草珊瑚18份、金粟兰6份,所有样品提取总DNA,并对草珊瑚与金粟兰干燥叶片进行DNA提取。通过对其ITS片段进行扩增、测序,并搜索GenBank数据库中收录的草珊瑚与金粟兰的ITS序列,进行同源比对后根据其变异位点设计特异性鉴别引物,构建多重PCR体系,并优化PCR条件,对草珊瑚与金粟兰叶片进行快速分子鉴定。构建了多重PCR鉴别体系,只经一个PCR反应,能扩增出草珊瑚580 bp的特异性鉴别条带及金粟兰470 bp的特异性片段,可快速鉴别草珊瑚与金粟兰叶片,并可判断相互是否混杂。使用双位点特异性PCR技术可以有效快速鉴别草珊瑚与金粟兰叶片,并可判断相互是否混杂。
研究有机溶剂二甲基甲酰胺(DMF)、甲苯(TOL)对全缘叶栾树生长的影响,结果表明,DMF 20 mg/L、TOL2 mg/L或TOL0.7 mg/L+DMF 10 mg/L会引起植株死亡,说明复合处理对全缘叶栾树的毒性更大。DMF处理过的植株叶绿素含量下降,说明DMF具有抑制叶绿素合成作用;可溶性总糖、丙二醛(MDA)含量变化不大,说明DMF对养分积累和膜结构影响小;可溶性蛋白含量、总抗氧化能力上升,表明DMF具有刺激植株代谢及抗氧化系统的作用。TOL处理过的植株谷胱甘肽含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力呈下降趋势,丙二醛含量呈上升趋势,说明TOL对植株的抗氧化系统和膜结构有一定损伤作用。DMF、TOL复合处理的叶绿素、可溶性总糖、可溶性蛋白含量下降,复合处理抑制叶绿素合成及植株养分积累;谷胱甘肽、SOD活性、总抗氧化能力下降,MDA含量上升,表明复合处理具有破坏植株抗氧化系统、损伤膜结构的作用。
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