目的建立TaqMan探针荧光定量PCR检测方法,用于临床标本中尖孢镰刀菌的快速诊断。方法针对尖抱镰刀菌的B—tubulin基N。设计特异性引物和探针并构建该基N的重组质粒标准品;优化PCR反应条件,建立尖孢镰刀菌的荧光定量PCR检测方法;通过lO种标准菌株和33株,临床分离株的应用检测,验证该方法的可行性。结果该检测方法具有较好的特异度、敏感度和重复性,6袜尖孢镰刀茵均有明显扩增,而其它37株临床常见的致角膜炎真菌标准株或分离株无明显扩增;最低检出限为408copies/μl,且变异系数低于5%。结论研究成功建立了尖孢镰刀菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法,对临床上真菌性角膜炎的快速诊断及指导用药具有实际应用性和重要意义。
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