更新日期: 2024-03-29

原料乳中沙门氏菌的快速过滤富集及PCR检测

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原料乳中沙门氏菌的快速过滤富集及PCR检测 4.5

尽管国内外以PCR技术为基础对食源性致病菌的检测手段已经基本成熟,但是由于大多数有8~12h的预增菌步骤,从而增加了检测时间和检测成本。建立了对原料乳中沙门氏菌的快速、简单、灵敏PCR检测技术。人工污染沙门氏菌的原乳,先离心脱脂,然后添加Na2EDTA获得澄清乳液,最后通过0.45μm微膜过滤收集菌体。整个PCR检测过程可在6.5h以内完成,且检测灵敏度可达到1~10mL-1。该方法值得推广,应用于原乳中该食源致病菌的日常检测。

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多重PCR检测病死鸡中沙门氏菌方法的研究

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为了建立能够同时检测病死鸡样品中的沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的多重pcr方法.采用煮沸法提取dna做为模板,选择分别针对沙门氏菌属、鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的特异性基因(inva、flic、sdfⅰ)设计引物,优化反应体系和反应参数,建立多重pcr检测方法.应用该方法对国内17家鸡场369份病死鸡样品进行沙门氏菌的检测,检测结果与传统细菌培养法的结果进行比较.结果表明,优化过的多重pcr可同时对沙门氏菌种、属进行鉴定,灵敏度为4.6×102cfu/ml;多重pcr方法共检测出沙门氏菌34株,其中鸡白痢沙门氏菌21株、肠炎沙门氏菌5株,与传统细菌培养法检测结果的符合率分别为91.2%、90.5%和80.0%.

双重PCR检测沙门氏菌和变形杆菌方法的建立 双重PCR检测沙门氏菌和变形杆菌方法的建立 双重PCR检测沙门氏菌和变形杆菌方法的建立

双重PCR检测沙门氏菌和变形杆菌方法的建立

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目的:建立快速鉴定腹泻患者粪便标本中沙门氏菌和变形杆菌的双重聚合酶链式反应(pcr)方法。方法:针对沙门氏菌属特异基因inva和变形杆菌属特异基因tuf分别设计特异性引物,将天津某医院肠道门诊腹泻患者粪便标本经ss培养基分离培养后,对可疑菌株同时进行inva-tuf基因双重pcr鉴定和生化鉴定,比较两种方法结果的一致性;对沙门氏菌进一步行血清学分型。结果:双重pcr和生化反应都各自鉴定得到沙门氏菌31株和变形杆菌62株,而且二者鉴定结果完全一致;31株沙门氏菌包括鼠伤寒、肠炎等常见血清型和格兰扁、菲尔摩雷等罕见血清型,均能扩增出283bp长度片段,62株变形杆菌包括48株奇异变形杆菌、8株普通变形杆菌、2株潘氏变形杆菌、4株产黏液变形杆菌,均能扩增出541bp长度片段。结论:inva-tuf基因双重pcr方法能够快速可靠地鉴定ss培养基上生长的沙门氏菌和变形杆菌。

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沙门氏菌的实验室检验技术

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沙门氏菌的实验室检验技术 4.7

本研究对80份沙门氏菌样品进行前增菌,然后用荧光pcr方法对前增菌样品进行检测,挑取阳性样品进行后续的分离、鉴定。结果显示,本研究在传统沙门氏菌分离、鉴定方法基础上增加了荧光pcr初步筛选,提高了检测的灵敏度与特异性,省工省时,最终分离到12株沙门氏菌。

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甲型副伤寒沙门菌套式PCR检测方法的研究 4.4

目的探讨套式聚合酶链反应(nestedpolymerasechainreaction,nested-pcr)快速检测伤寒杆菌的实验方法。方法根据副甲伤寒杆菌鞭毛抗原基因dna核苷酸序列设计特异寡核苷酸引物,建立套式pcr技术,对1株伤寒杆菌及5株非伤寒杆菌进行扩增。结果除副甲伤寒杆菌出现343bp的特异性扩增区带外,其他5株非伤寒杆菌均为阴性。结论nested-pcr是一种快速、敏感、特异检测伤寒杆菌的方法,为伤寒的临床早期诊断和及时治疗提供客观依据。

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目的探讨一种操作简单、检验成本低、阳性检出率高的预防性健康体检中沙门菌的检测方法.方法对食品及公共场所从业人员体检1045人的粪便标本接种氯化镁孔雀绿(mm)增菌液,分别在37℃、42℃增菌后,再进行平板分离、生化及血清鉴定,比较两种不同温度增菌后沙门菌的阳性检出率.结果42℃增菌后检出率(2.78%)高于37℃增菌检出率(0.57%),两者之间的差异有统计学意义(χ2=15.371,p<0.05).结论传统的培养法仍是预防性健康体检中沙门菌常用的检测方法,42℃增菌后具有更高的检出率,更适用于预防性健康体检中沙门菌的分离鉴定.

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目的建立一种快速敏感检测鲜乳中金黄色葡萄球菌肠毒素a的方法。方法将金黄色葡萄球菌模拟污染鲜乳后,提取菌体dna,以大肠杆菌作对照,用双重pcr法扩增金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因和肠毒素a基因。结果在含金黄色葡萄球菌(1×104个/ml)的模拟鲜乳样品中检出金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因和肠毒素a基因,而大肠杆菌对照未出现特异性片段;pcr方法灵敏度分析显示,其检测限为100cfu/ml。结论建立的直接检测金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因和肠毒素a基因的双重pcr方法,具有速度快、特异性强、灵敏度高和易操作的特性,可用于金黄色葡萄球菌食源性疾病与食物中毒的实验室诊断。

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目的加快沙门菌的检验速度,提高阳性检出率。方法采用沙门菌测试片检验人体中的沙门菌,并与传统的平板分离法进行对比试验。结果测试片法沙门菌最小检出量0.022cfu/ml,敏感度为1.5×10-8,特异性高。比平板分离法最小检出量提高2个指数,阳性检出率可提高25.50%~30.50%,敏感度可提高2个稀释倍数。结论测试片法操作简单,方便快捷,结果观察易判断,方法准确可靠,工作周期短,可减少2/3的工作周期。

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刘晓燕

职位:装配式BIM工程师

擅长专业:土建 安装 装饰 市政 园林

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